胃がんは.中国において最も一般的な消化管の悪性腫瘍の一つであり.世界的にも高い発生率と死亡率を誇っています。 発症が早く早期発見率が低いため.発症後は中・後期となることが多く.治療効果も乏しいため.人の健康を脅かす重大な病気となります。 胃がんの発生メカニズムを深く研究することは.胃がん治療の指針として臨床的に大きな意義があります。
Paxillinは近年発見された重要な細胞接着因子であり.腫瘍化チロシンキナーゼの基質.インテグリンと結合し.細胞と細胞外マトリックスの局所接着の重要な部位を構成し.細胞の移動と拡散を制御し.腫瘍細胞の転移・浸潤能力を高めています。
血管内皮増殖因子（VEGF）は.強力な血管新生促進因子であり.特異性の高い血管内皮細胞分裂促進因子であり.腫瘍組織における新生血管の形成を促進し.それによって腫瘍の成長と進行を促す糖化分泌ペプチドである。 結節性胃がん組織におけるPaxillinおよびVEGFの発現と胃がんの臨床病理学的特徴との関係を理解するために.免疫組織化学を用いて胃がん組織におけるPaxillinおよびVEGFのタンパク質発現レベルを検出し.胃がんの生物学的挙動との関係を検討した。
1.材料と方法
1.1 材料 2009-01 から 2009-07 にかけて.山西医科大学第一臨床医学院で外科的に切除された胃癌の検体 55 例を収集した。 内訳は.男性38例.女性17例.男女比2.24：1.年齢は39歳から81歳.平均年齢63.56±10.58歳.病理学的分類：腺癌49例.低分化癌6例.中分化11例.高分化6例.PTNM期（UICC1997国際ステージ基準）：I期10例.II期13例.III期16例 上記の症例は.術前放射線治療を行っていない。
上記の症例はすべて.手術前に放射線治療や化学療法を行わなかった。 上記55名の胃癌患者の正常な胃縁から無作為に20例を選び.対照群とした。 すべての標本は病理学的に確認され.10％（中性）ホルムアルデヒドで（固定）.（パラフィン）包埋され.4μmの厚さで切片化された。
1.2 方法 免疫組織化学的二段階染色を用いた。 一次抗体である Paxillin と VEGF は福州舞心生物技術開発有限公司から購入したものである。 切片はオートクレーブによる組織抗原修復を施した。 染色手順は.キットの説明書に従って行った。 ポジティブコントロールとして既知のポジティブスライスを使用し.ネガティブコントロールとして一次抗体の代わりにPBSを使用した。
1.3 結果の判定 PaxillinとVEGFの陽性発現は.細胞質内に褐黄色の粒状物質が存在することと定義した。 各切片に代表的な高倍率の5フィールドを設け.各フィールドに100個の細胞をカウントし.陽性細胞の割合と染色強度を別々にスコア化した。 具体的な判断基準は以下の通りです。
(1) 染色の程度により採点：染色がない場合を0点.染色が弱い場合（数個の細胞のみが黄色または黄色から茶色に染色）1点.染色が強い場合（黄色から茶色に染色）3点.染色が中程度の場合（最初の2点の間の染色）2点。
(2) 染色細胞の割合による採点：染色細胞がカウントした細胞の5%未満は0点.5～25%は1点.26～50%は2点.51～75%は3点.75%超は4点。 (1)+(2)がトータルスコアで.0～7点です。 0点をマイナス（-）.1～2点を弱いプラス（＋）.3～5点をプラス（＋＋）.6～7点を強いプラス（＋＋＋）で表します。
1.4 統計 すべてのデータは.SPSS 17.0 統計パッケージを使用して分析された。 定性的データの比較は.χ2検定およびフィッシャーの正確確率法を用いて行った。
2.実績
2.1 胃がん組織と正常な最先端組織におけるPaxillinの発現量
Paxillinタンパク質の陽性発現は.主に細胞質内に黄色い粒状の物質が局在していることと定義した。 胃がん組織55例のうち.強陽性5例.陽性13例.弱陽性19例.陰性18例の計37例が陽性で.陽性率は67.27％であった。 正常胃切刃組織20例のうち.陽性発現は4例で.強陽性1例.陽性1例.弱陽性2例であり.陽性率は20.00%であった。 胃がん組織におけるPaxillinタンパク質の発現量は.正常切断端群に比べ有意に高く.その差は有意であった（P<0.01）。
2.2 胃がん組織と正常な最先端組織におけるVEGFの発現量
VEGFの陽性発現は.主に細胞質内に黄色い粒状の物質が局在して見えることと定義された。 胃がん組織55例のうち.強陽性5例.陽性13例.弱陽性22例.陰性15例の計40例が陽性で.陽性率は72.72％であった。 正常胃切刃組織20例中.強陽性1例.陽性2例.弱陽性4例の計7例が陽性発現し.陽性率は35.00%であった。 胃がん組織におけるVEGFの発現量は.正常刃先群に比べ有意に高く.その差は有意であった（P<0.01）。
2.3 Paxillinタンパク質の発現と臨床的特徴および病理学的パラメーターとの関係
Paxillin陽性発現は.腫瘍の大きさ.組織分化の程度.胃癌の浸潤深さ.TNMステージ.リンパ節転移と関連し.群間差は有意（P<0.05）であったが.性別.年齢とは関連がなかった。 0.05）であり.性別.年齢.腫瘍の大きさは関係なかった。
3.ディスカッション
細胞接着と腫瘍の関係は.近年盛んに行われているライフサイエンスの研究テーマの一つである。 Paxillinは相対分子量68×103のシグナルアダプタータンパク質で.主に接着斑に存在し.細胞と細胞外マトリックスの局所的な接着を構成している。 また.細胞シグナル伝達の重要な部位でもある。
インテグリンの活性化の初期には.Paxillinを含むいくつかのインテグリン関連タンパク質のチロシンリン酸化が観察される。 パキシリンと腫瘍細胞の浸潤・転移には一定の関連性がある。
paxillinの発現は.高分化型腺癌の組織よりも中分化型腺癌や低分化型腺癌の組織で.早期胃癌の組織よりも進行胃癌の組織で.リンパ節転移の組織よりも原発胃癌の組織で有意に高かった。食道癌の組織ではpaxillinは臨床病期とリンパ節転移と関連しており.有意に高かった。 また.Paxillinは大腸がんでも高発現し.がん組織の腸壁への浸潤の深さやリンパ節転移と密接に関連していた。
肝細胞癌患者では.paxillinの陽性率は低分化群で高分化群より高く.門脈血栓症患者では血栓症のない群より高く.肝外転移患者では肝外転移のない群より高かった。肺癌組織では.paxillinが陽性発現したものの半分以上はリンパ節転移があったが.陰性発現した肺癌のリンパ節転移は1/5未満であった。 Paxillinの発現は.胃がんの発生や転移に関連し.浸潤性転移や患者の予後不良の指標となる可能性があります。
本研究では.胃癌組織におけるPaxillinタンパク質の高発現は正常胃縁組織と有意に異なり（P<0.01）.Paxillinの陽性発現は腫瘍サイズ.組織分化.胃癌浸潤深さ.TNMステージ.リンパ節転移と関連しており.群間で有意差があった（P <0.05） 。 このことから.Paxillinは胃がんの発生・進展に関与し.胃がんの予後不良に影響する因子であることがわかりました。
血管内皮増殖因子（VEGF）は.血管透過因子（VPF）とも呼ばれ.血管内皮細胞に特異的に作用する増殖因子である。 近年.VEGFと悪性腫瘍の関係が重要視され.研究が進んでいます。 悪性腫瘍組織におけるVEGFの発現量の増加は.腫瘍の発生.発達.転移の過程で極めて重要なステップである腫瘍血管新生を促進することが分かっています。
腫瘍の新生血管は.酸素.栄養素.代謝産物を運搬し.腫瘍組織の無制限な増殖の必要性を満たす一方で.新生血管の不完全な基底膜と血管透過性の増大は.腫瘍の浸潤と転移に都合のよい条件を提供します。
VEGF遺伝子は胃がん組織で高発現しており.腫瘍の浸潤深さ.臨床病期.リンパ節転移と有意な相関があることが示されています。 胃がん組織におけるVEGFの発現は.組織分化の程度.胃がん浸潤の深さ.TNMステージ.リンパ節転移と関連しており.VEGFが胃がんの予後不良に影響する因子であることが示唆されました。
以上のことから.PaxillinとVEGFは胃癌の発生・進展に関与し.胃癌の予後不良に影響する因子であることが示唆された。 両者の発現は.組織分化の程度.胃がん浸潤の深さ.TNMステージ.リンパ節転移と密接に関連しており.胃がん組織におけるPaxillinとVEGFの発現の複合検出は.単一の指標よりも正確に予後を判定できることが示唆された。 局所リンパ節転移を有する症例では.PaxillinとVEGFの陽性発現率が有意に高く.胃癌の局所リンパ節転移のリスク上昇を示唆し.胃癌手術の根治範囲や術後化学療法に一定の指針的意義があることがわかった。
また.胃癌の発生においては.PaxillinとVEGFが相互作用し.VEGFがPaxillinをチロシンリン酸化することで腫瘍細胞の移動・浸潤を促進し.その結果.Paxillinの発現が亢進している。 Paxillinをターゲットにすることで.腫瘍の発生や進行を止めるだけでなく.腫瘍の血管新生を阻害し.化学療法剤に対する腫瘍の感受性を高めることができます。