染色体検査でスーパーヒーローの診断を確認するには?

超アンドロゲン症候群は.有害化学物質.X線照射.環境要因の影響.妊娠年齢の進行.近親婚などにより.妊娠時の染色体数.形態.構造.結合に変異が生じることによって引き起こされる疾患である。 羊水細胞の染色体検査は.スーパーオキシド症候群の出生前診断において非常に重要である。 羊水細胞培養染色体検査決定の原則は.羊水細胞は胎児の皮膚.消化管.呼吸器系.泌尿生殖器系から排出される細胞であり.約95%は死滅細胞であるため.細胞培養しなければならず.生きた細胞を十分に増殖させ.核型分析のために細胞を採取する。 操作方法は以下の通り:1.妊娠16-20週の羊水15-30mlを取り.1000r/mlで10分間遠心分離する。2.余分な上清を捨て.羊水と沈殿した細胞1mlを残し.静かに細胞懸濁液にほぐす。 3.栄養塩基3mlと子牛血清1mlを37℃の培養器に入れる。 4, 培養7~10日後.多数の線維芽細胞様または上皮細胞様のコロニーが見られる。 この時.新鮮な培地に交換することができる。 5.細胞コロニーを拡大し.半透明の丸い分裂細胞が多数見られるようになったら.コルヒチンを最終濃度が0.1~0.3μg/mlになるように添加し.37℃のインキュベーターに入れ.5~6時間培養する(以上の工程は無菌状態で行う)。 採取基準:①線維芽細胞が主体となってパッチ状に増殖していること ②10倍の接眼レンズと20倍の対物レンズで観察し.細胞クローンの増殖が1視野以上であること ③半透明の丸い細胞が10個以上.二重丸の明るい分裂細胞が10個以上確認できること。 6.細胞の増殖が旺盛でない場合.増殖周期が揃っていない場合.細胞が老化して収穫基準に達していない場合.元の瓶で継代培養を続けることができる。 方法:まず無菌状態で培地を注ぎ落とし.2.5g/Lの滅菌トリプシン溶液を数滴加え.振ってから注ぎ落とす。 さらに5~10滴のトリプシンを加え.37℃で約5分間穏やかに振盪し.接着細胞を剥離する。 子牛血清を含む新しい培地4mlを加え.37℃で4~5時間培養する。その後.注意深く培地を交換し.培養を続け.通常継代後3~5日で収穫する。 7, 培地を目盛り付き遠心チューブに移し.培養フラスコにED-TA-トリプシン溶液1mlを加え.37℃のウォームボックスに5分間置いた後.エルボ付きピペットで付着細胞をすすぐ(消化には2.5g/Lのトリプシン溶液も使用できる)。 8.上清を吸引して捨て.あらかじめ加温した0.075mol/L KCl低張液3~5mlを加え.37℃で10~15分間静置した. 固定・調製は末梢血染色体標本の調製法と同様である。 正常な場合.染色体の総数は46本であり.そのうち常染色体は22対(連番1〜22).性染色体は男性がXY.女性がXXであり.男性の核型は46, XY.女性の核型は46, XXである。 染色体検査は.様々な染色体数の異常:例えば.ダウン症(トリソミー21).トリソミー18.トリソミー13.トリソミー8.トリソミー22.先天性トリソミー.トリソミー3.先天性染色体などに適用される。 トリソミー18.トリソミー13.トリソミー8.トリソミー22.先天性精巣低形成症候群.XXY症候群.ターナー症候群.トリソミーX.ポリX症候群。