臨床では通常.ADSCを含むSVFは腹部や大腿部の脂肪吸引によって得られ.遠心分離.消化.洗浄などを経て脂肪組織と一定の割合で混合され.レシピエント部位に移植される。 また.SVFを試験管内で培養して壁増殖型ADSCを得ることもでき.試験管内で増殖状態の良いADSCを採取して脂肪組織との複合移植を行うこともできる。 CAL技術は標準化されており.自動化も容易であるため.工業化された装置が利用できるようになり.この技術の普及と応用がより便利になった。 I. SVF CAL技術の応用 (a) 脂肪吸引 ヒトの腹部および大腿部の皮下脂肪は.ADSCが最も豊富であることが研究により判明している。 従って.CAL技術では脂肪提供部位として上記2つの部位を選択することが多い。 無菌の手術室で.脂肪吸引部位に膨潤液で麻酔をかけ.通常の方法で直径2.5～3mmの吸引チューブを通して脂肪を吸引する。 陰圧式脂肪吸引チューブで吸引された混合物には.膨潤液成分.脂肪組織.結合組織.血球.その他の組織片が含まれる。 (ii) SVFの調製 吸引した脂肪を2つに分け.一方をSVFの抽出に使用し.その後.抽出したSVFをもう一方の脂肪と混合し.その混合物を移植に使用した。 したがって.ADSCを含むSVFを抽出する工程は.CAL手技の重要なステップである。 全分離工程は通常70-80分かかり.基本的な工程は以下の通りである。 1.遠心分離 吸引によって得られた脂肪の半分を遠心分離し.脂肪細胞.脂質.血球などの成分を分離する。 遠心分離後.混合物は上層.中層.下層に分けられる。上層は主に脂肪の層で.脂肪細胞を破砕した後の産物であるトリアシルグリセロールとセリアック粒子を含む。中層は主に脂肪の精製のための層で.下層は血球.血漿.濾液などを含む。 この時点で.中間層は精製された脂肪組織である。 脂肪組織の一方は予備として保存し.もう一方はSVFを提示するために以下のステップを続けるために取り出される。 2.消化 脂肪部分は.0.075%滅菌コラゲナーゼを等量加え.振動（37℃.30分）により消化される。 洗浄 リン酸緩衝液(PBS)または生理食塩水による洗浄と遠心分離を繰り返し.脂肪部分と液体部分を分離した。 脂肪画分を捨て.液体画分を残した。 PBSまたは生理食塩水で洗浄し.遠心分離する。 遠心分離により得られた下層の有形細胞画分は.ADSCに富む細胞の混合物であるSVFであり.ADSCの他に血液由来の細胞.血管内皮細胞などが存在する。 (iii) 脂肪組織-SVF複合体の形成 吸引で得られた脂肪の残り半分を.処理で得られたSVFと混合し.15分間放置すると.ADSCが脂肪に完全に吸着した。 これらの脂肪は活性のある生物学的足場に似ており.移植片として確保される。 単離された細胞は量と質を厳密に検査する必要があり.細胞の活性を確認するためにSVFの小部分を細胞培養用に抽出することもできる。 (D）脂肪組織-SVF複合体移植 脂肪組織-SVF複合体移植は.従来の脂肪移植法に準じて行った。 次に.ADSC CAL技術の応用である。 (1)上記と同じステップで脂肪吸引.SVF調製を完了する。 (2) ADSCの培養：培養容器に植え付け.細胞培養液（一般に10％ウシ胎児血清を含むDMEM培養液を使用）で培養する。 SVFに含まれる多くの血球成分は壁に付着して増殖できないため.溶液を交換することで除去できる。 壁接着細胞は培養を続ける。 ある程度の数まで増殖した後.懸濁液を作り.吸引した脂肪組織と混合して適用する。 (3) 脂肪組織-ADSC複合体形成：脂肪組織を再懸濁し.細胞懸濁液をそれと混合し.ADSCが脂肪に完全に吸着するように15分間放置する。 (4) 脂肪組織-ADSC複合体移植：脂肪組織-SVF複合体移植は.従来の脂肪移植法に準じて行った。