現在のところ、葉酸に対する明確な禁忌はない。 葉酸は水溶性ビタミンであるため、食品に広く含まれ、容易に摂取することができる。 葉酸を過剰に使用しても尿中に排泄され、体内に蓄積されることはないため、比較的安全であり、明確な禁忌もない。 ただし、葉酸の使用には次のような注意事項がある：大量摂取は亜鉛の吸収に影響を与えるため、亜鉛の補給が必要である。 人によって葉酸の必要量は異なるので、正確な摂取量については医師に相談する必要がある。 悪性貧血でビタミンB₁₂欠乏が疑われる患者、特に神経症状のある患者は、葉酸単独では使用できず、同時にビタミンB₁₂を補充する必要がある。 葉酸の医薬品を購入する場合は、医師の指導のもとで使用する必要があり、無許可で使用することはできません。