コレステロールの作用・働きには、胆汁酸の形成、細胞膜の形成、ホルモンの合成、ビタミンDの合成、エネルギーの供給などがある。
1.胆汁酸の形成：コレステロールは胆汁酸を形成し、胆汁を作る重要な原料のひとつとなる。
2.細胞膜の形成：細胞膜の主成分はリン脂質二重層であり、コレステロールに含まれるリン脂質は細胞膜の主成分であり、細胞膜の構造と安定性の維持に重要な役割を果たしている。
3.ホルモンの合成：副腎皮質刺激ホルモン、アンドロゲン、エストロゲンなど、人体の多くのホルモンの合成にはコレステロールが関与しており、ステロイドホルモンに属し、その前駆物質はコレステロールである。
4.ビタミンDの製造：ビタミンDは人体に必要な重要な栄養素の一つであり、日光が皮膚に当たると、コレステロールを原料としてビタミンDが合成され、骨や歯を丈夫にします。
5.エネルギーの供給：コレステロールは吸収・代謝され、体に必要なエネルギーを供給する。