G6Pase
は.糖新生と解糖の過程で重要な役割を果たす酵素で.主に肝臓.腎臓.小腸に発現しており.血糖値を正常に保つために重要な役割を担っています。
G6Paseは.17番染色体第2領域バンド1の長腕に位置し.約12.5kb.5個のエキソンを含んでいます。G6Paseタンパク質は.357アミノ酸を含む小胞体膜タンパク質で.9個の膜貫通ユニットを持つ高疎水性で.そのN末が小胞体の内腔に.C末が細胞膜に位置することが確認されています。
G6Pase遺伝子がクローニングされる以前は.出生前診断は胎児肝穿刺生検によりG6Pase活性を測定していたが.侵襲性が高く.酵素活性測定法の再現性が低いため.ほとんど利用されていなかった[5]。
近年.G6Pase
cDNAのクローニングにより.世界中のG6Pase遺伝子の変異スペクトルや変異のホットスポットが明らかとなり.分子生物学による出生前診断が可能となった。
現在までに.G6Pase遺伝子のコーディング領域には70以上の変異が同定されている。
海外の文献では.変異の検出による出生前診断を受けたGSD
Iaの4家族が報告されている[6-9]。
白人に多いR83CやQ347X変異など.民族や地理的背景の異なる集団でいくつかの共通した変異型が見つかっている[10]。
我々の最近の研究では.26人の中国人GSD
Ia患者において.727G→T変異が全変異の78.85%を占め.R83H変異が13.46%を占め.727G→TとR83H変異を合わせて全変異の約92%を占め.中国人に最も多いホットスポット変異となっています
[11]．
このように変異が集中していることから.まず制限酵素プロファイリングを適用して727G→TとR83Hの変異をスクリーニングし.その後DNAの直接塩基配列決定によりその他の変異を検出することにより.中国人集団における遺伝子診断や出生前診断を実施することが可能となる。
本研究の3家族において遺伝子診断と出生前診断を迅速に明らかにしたのはこの方法である。 出生前診断は.遺伝性代謝疾患の発症を防ぐための最も有効な手段の一つであり.正確かつ迅速な診断を行うためには.さまざまな方法を組み合わせて用いることが最善である。
多型連鎖解析は.特定の家系の遺伝子内または遺伝子に隣接する多型座位または断片を用いたハプロインスフィア連鎖解析を行い.疾患原因遺伝子に連なる多型座位または断片に基づいて間接的に診断を行う方法である。
G6Paseの3’非翻訳領域の1176番遺伝子座の一塩基にはTまたはCの多型があることが判明し（Genbank
U01120）.我々の先行研究では.中国人の約46％（24/52）が1176C.54％（28/52）が1176Tであり.中国人のこの一塩基多型遺伝子座の多型情報を発見している
G6Pase遺伝子は12.5kbの長さがあり.1176T/CはG6Paseの最後のエキソンから22bpしか離れていないため.1176T/CとG6Pase変異部位との間の組換えの可能性は無視でき.GSD
Ia家の出生前診断およびキャリア診断に1176T/Cが有用であることがわかる。
このことから.1176T/CはGSD
Ia系統の出生前診断や保因者診断に大いに関係がある。
本研究では.系統1の両親は共に1176T/Cのヘテロ接合体であり.出生前のキャリアは1176Cの純粋なヘテロ接合体であり.胎児は1176T/Cのヘテロ接合体である。この系統では.1176多型遺伝子座の家族連鎖解析のみによって確定した出生前診断が可能であった。
家系2および3では.父親は1176T/Cのヘテロ接合体であり.母親は1176Cの純粋なヘテロ接合体であり.出生前の目撃者は1176Cの純粋なヘテロ接合体である；この家系では1176遺伝子座一塩基多型は情報の50％を提供するだけである.すなわち胎児が1176T/Cのヘテロ接合体のとき.および胎児が1176のヘテロ接合体のときのみ.明確な出生前の診断は行うことが可能である。
胎児の1176遺伝子座の一塩基多型は.1176C遺伝子座の純粋な一塩基多型であり.出生前診断は行なえない。