アレルギー性疾患は.生体が様々な物質に対して不耐性を示したり.あるいは不耐性を示したりした場合に起こる病的な免疫反応であり.その発症率はここ20〜30年の間に世界中で毎年増加する傾向にあり.英国では毎年5％のアレルギー性喘息の子供が増加している。 この疾患の範囲は皮膚科.耳鼻咽喉科.呼吸器科.消化器科.小児科に及び.人体に対するリスクの程度は様々で.重症の場合は生命を脅かす状態に至ることさえある。 アレルギー疾患の原因となる抗原は300以上同定されており[1].アレルゲンの同定はアレルギー疾患の診断.特異的免疫療法.アレルゲンへのさらなる暴露予防の鍵となる。 現在.中国には多種多様なアレルゲン検出法と試薬があり.検査結果に大きな差が生じ.臨床診断と治療に混乱をもたらす。 しかし.本稿ではアレルゲン検査の方法.結果の分析.問題点.治療指針を中心に検討し.臨床標準化作業の参考とする。
1. In vivo検査
アレルギー性疾患はIgEを介したI型即時型アレルギー反応であり.アレルゲン検査はin vivoとin vitroの両方で行うことができる。 in vivo検査では.肥満細胞の脱顆粒による皮膚・粘膜反応を示すことができる。 中国で一般的に使用されているアレルゲンスポッティング溶液と皮膚テスト溶液は.北京ユニオン医科大学病院代謝反応部の研究室が提供する精製溶液と.ドイツのAllergoPharma社およびデンマークのALK社が提供する標準化試薬である。 各製品は原理は同じで.操作方法もほぼ同じで.結果も同様に判定されるが.含まれるアレルゲンの濃度が異なるため.得られる結果は同じではない。
1.1 皮膚テスト
1.1.1 方法と結果 皮膚プリックテスト（SPT）は.ドイツのAllergoPharma社の標準化されたプリック溶液に基づいている。 方法：前腕掌側の皮膚にアレルゲンプリック液を滴下し.皮膚上の試験液滴下部からプリック針を垂直に皮膚に刺入し.10～20分後に結果を読み取った。陰性コントロールとして0.4％フェノール生理食塩水を.陽性コントロールとして0.4％フェノールを含む0.1％ヒスタミン溶液を用いた。 結果は以下のように判定された：周囲に紅斑を伴う黄色っぽい皮膚腫が出現すれば陽性反応である。 ダーマトームがヒスタミンより大きい場合は＋＋＋＋.ダーマトームがヒスタミンと等しい場合は＋＋＋＋.ダーマトームがヒスタミンより小さい場合は＋＋＋または＋＋＋.ダーマトームが生理食塩水と同じ場合は陰性である。 皮内テスト（IT）は.ドイツのAllergoPharma社の標準化された皮膚テスト溶液を用いて行った。 方法：0.01～0.05mlの皮膚試験液を上腕外側部または背部の皮膚に注射し.10～20分後に結果を読み取った。 対照として.アレルゲン皮膚反応液を用い.単位は上記と同様とした。
1.1.2 臨床応用 皮膚テストは100年以上前から臨床に応用されており.アレルギー性鼻炎.湿疹.アレルギー性喘息などのアレルギー疾患の診断や特異的免疫療法の前に用いることができ.特異度が高く.偽陽性率が低く.簡便.正確で経済的である。 皮膚プリックテストは.その安全性.操作の容易さ.感度の高さ.臨床的妥当性の高さ.苦痛の少なさ.副作用の少なさ.小児や高感受性者への適合性から.欧州アレルギー臨床免疫学会（EAACI）によって最良の生体内診断法として推奨されている[2]。 禁忌：ペニシリン皮膚テストによるアナフィラキシーショックの既往歴のある者；全身状態を著しく損なう疾患；テスト部位に皮膚病変を伴う疾患；β遮断薬またはACE阻害薬を投与中の患者；アドレナリンアレルギーのある患者；妊娠中；5歳未満。 相対的禁忌：本剤の半減期3時間以内に抗ヒスタミン薬を服用している；可能であれば.症状が軽いときに診断を下すようにする。 合併症：局所的な発疹.皮膚壊死；ごくまれにアナフィラキシー.喉頭浮腫などの全身性の重篤な副作用。
1.2特異的誘発試験（SPT）は.自然発症の条件を模擬し.少量のアレルゲンを用いて軽いアレルギー反応を起こし.アレルゲンを判定する試験である。 患者の体の各部位に応じて.誘発試験は異なる臓器で行うことができる。
1.2.1 気管支誘発試験の方法と結果：試験前に1秒呼気量（FEV-1）とスパイロメトリーを測定し.対照液または抗原液を吸入し.吸入後15～20分後にFEV-1を再検査する。 陽性の判定基準は以下の通り：(1)胸のつかえ.喘鳴などの明らかな自覚症状.(2)肺のゴロゴロ音.(3)FEV-1の20％減少。 FEV-1が20％以上減少。 鼻粘膜興奮試験は.抗原吸入法（粉末）または滴下法（液体）で行うことができ.抗原曝露15～20分後に粘膜浮腫と蒼白が出現し.鼻のかゆみ.鼻水.くしゃみなどの症状があれば陽性反応と判断できる。 結膜刺激試験は.患者の片側の結膜に適切な濃度のアレルゲンを滴下し.もう片側には対照として生理食塩水を滴下する。
1.2.2臨床応用：励起テストの適応症は.臨床的にアレルギー疾患が強く疑われるが.皮膚テストやin vitroテストが陰性である患者；様々なアレルゲンに対するアレルギーで.原因となるアレルゲンを探している患者；アレルギー性喘息患者で.免疫療法を行う前にその耐性を理解したい患者などである。 食物アレルギーの患者は診断のゴールドスタンダードである。 誘発テストは皮膚テストよりも特異的で.患者の病歴.症状.アレルゲン吸着テストとの相関が高い。
このテストは.重篤な急性喘息発作やアナフィラキシーなどの重篤な合併症を引き起こす危険性があるため.使用する抗原の濃度は高すぎず.小さいものから大きいものへと増やしていく必要があります。
1.3アトピーパッチテスト（APT）
1.3.1方法と結果
Swedish Chemical Diagnostics ABのヨーロッパ標準アレルゲンの試験装置とパッチテストを例に挙げる。 適量のアレルゲンをパッチテスターの小室に入れ.液体アレルゲンの場合は.まずろ紙をパッチテスターに入れ.アレルゲンを滴下した。 アレルゲンを添加したパッチテストテープを.病変のない肩甲骨下の患者の背部皮膚に貼付し.ラベルを貼り.患者に3日間激しい運動をしないよう指示した；48時間後にパッチテスト材を剥がして観察し.72時間後に再度観察し.結果を判定した[3]。 解釈基準は.国際接触皮膚炎研究グループ[4]が推奨する基準に基づいている。
1.3.2 臨床応用
主に接触皮膚炎の診断に用いられ.簡便で正確な結果が得られる。 パッチテストの感度は97.8%.特異度は76.9%.正確度は90.3%.陽性適中率は88.2%.陰性適中率は95.2%である。 相対的禁忌：広範囲の皮膚病変を有する者。 副作用は軽度で.発疹やかゆみが報告されている[3]。
2. in vitro検査
in vitro検査は免疫化学的測定法であり.一般に血清中のsIgEを検出します。適応は.(1)広範囲の皮膚病変があり.検査ができない.(2)抗原によって誘発される重篤なアレルギー反応の既往があり.in vivo検査では危険である.(3)抗ヒスタミン剤を服用すると皮膚反応が抑制され.皮膚検査の結果が不正確になる.(4)皮膚検査として使用できない抗原.例えば化学物質など[2]。 (5)皮膚テスト結果が臨床病歴と一致せず.さらなる分析と検証が必要である。(6)明確な責任アレルゲンの前に特異的免疫療法が必要である。 in vitro検査は副作用や禁忌がなく安全である。 国内ではさまざまな検出システムが登場しているが.その原理は次のとおりである。
2.1 放射性アレルゲン吸着検査（RAST）
2.1.1 検出原理と結果 ファルマシア社（スウェーデン）製のUni-CAPシステムが最も代表的で.その基本原理は免疫CAPと呼ばれる新しいタイプの固体にアレルゲンを吸着させることである。 後者は.活性化セルロース誘導体から合成された小さなカプセルに入った親水性担体ポリマーで.アレルゲンとの結合能が非常に高い。 各固相担体CAPは異なるアレルゲンでカプセル化され.患者の血清中にアレルゲンが存在する場合.そのアレルゲンと特異的に結合する。その後.酵素標識ウサギ抗ヒト抗IgE血清（ELISA）を添加し.固相担体-アレルゲン-IgE-ELISA複合体を形成する。 洗浄後.マトリックスを添加し.最後に展開液を添加すると.蛍光が発せられ.蛍光吸光度によりIgE含量が換算され.被検血清の蛍光吸光度が基準品より大きいものを陽性.小さいものを陰性とし.主操作手順は装置により自動的に終了し.結果は装置により自動的にプリントアウトされます[5]。 KUPLはクラス5.>100.0KUPLはクラス6です[2]。
2.1.2 システムの特徴：CAPシステムは反応条件と拡散距離が短く.高い感度と特異度を有し.陽性適中率は95％以上である。 アレルゲンの皮膚テストとCAPの結果の適合率は高く.86.2～96.6％に達する；両者の相関は良好で.順位相関係数は0.661～0.957である[5]。 1アレルゲン1反応キャップ.臨床的選択は.不必要な浪費を避けるために.多くても少なくても.どのような組み合わせでもよい。 採血量も少なく.痛みも少ない。
2.2 酵素結合免疫測定法（ELISA）
2.2.1 検出原理と結果：米国ASI社のアレルゲン体外検出キットを例にとると.その基本原理は.表面にアレルギー抗原を固着させた担体と患者の血清を一緒に培養すると.血清中の特異的IgEが抗原に特異的に結合し.抗原に特異的に結合した抗体は酵素結合した二次抗体によって認識されます。 この特異的に結合した抗体は.酵素結合二次抗体によって認識することができ.二次抗体に結合した酵素は.発色剤を添加すると.発色剤の色を橙色から青色に変化させる。 発色の深さは血清中の特異的IgEに比例し.血清中の特異的IgE濃度を定性／半定量的に検出することができます。 結果判定：発色の違いにより.5段階（0～4）に判定できます。
2.3 Immunoblotting法
2.3.1 検出原理と結果：MEDIWISS社（ドイツ）のAlleryScreenアレルゲン検出システムを例に挙げる。 ニトロセルロース膜の表面に特異的アレルゲンを吸着させ.患者血清を加えてインキュベートすると.検体中の特異的IgEがアレルゲンと反応してニトロセルロース膜に結合する。 アルカリホスファターゼ標識ストレプトアビジンを加え.ビオチンと結合させる。 BCIP/NBT酵素活性化基質を加えてインキュベートすると.基質特異的酵素発色反応が起こり.試薬ストリップ上に沈殿が現れる。 試薬ストリップを乾燥させた後.特殊なアレルゲンモニターで検出し.定量結果を読み取ります。
2.3.2 システムの特徴：他の方法がアレルゲンを共有結合で固相に結合させるのに対し.このシステムの濃縮アレルゲンは非修飾でニトロセルロース膜に付着しており.ビオチンアフィニティー増幅システムの使用により.微量のIgEでも検出できる。 AlleryScreenシステムはCAPシステムと同様の優れた感度を持つが.皮膚テストよりわずかに低い。 AlleryScreenシステムは.CAPシステムと同様の優れた感度を持つが.皮膚テストよりわずかに低い。 1検体で20抗原まで検出でき.必要な血清量はわずか250μlで.臨床スクリーニング検査として使用できます。
3.アレルゲン臨床検査の選択と診断
アレルギー疾患のアレルゲン診断は.明確な臨床病歴（アレルゲン吸入アレルギー歴.接触アレルギー歴.食物アレルギー歴）.皮膚テスト.特異的興奮テスト.血清特異的IgEテストなどを含む総合的なプロセスである。
アレルギー疾患の検出には.皮膚プリックテストが最も有効である。
皮膚プリックテストが好まれるのは.簡単で経済的で安全だからです。
皮膚テストが病歴と一致すれば.診断が確定する。 病歴と一致する皮膚テスト陽性は.その疾患のアレルゲンであることを示唆する。逆に.病歴が陰性で皮膚テストが陰性であれば.基本的にアレルゲンは疾患とは無関係であると考えられる[2]。 多発性アレルゲン感作を診断するための皮膚テストは.血清IgEおよび誘発テストとともに行い.原因となるアレルゲンを同定する必要がある。 皮膚テストが病歴と一致しない場合は.さらに血清IgEと誘発テストを行い.総合的に分析すべきである。
血清特異的IgE検査は.皮膚検査.病歴と一致しない皮膚検査.多発性アレルゲン過敏症と診断された皮膚検査の禁忌として用いることができる。 多発性アレルゲン過敏症の患者では.皮膚テストと血清特異的IgEの評点が高いアレルゲンを責任アレルゲンとみなすことができる。
特に食物アレルギーの患者では.食物アレルゲンの皮膚反応や特異的IgEの精度が低いため.標準化された誘発試験が最も信頼できる特異的診断法であり.無作為化二重盲検食物誘発試験が食物アレルギーの診断のゴールドスタンダードである。 誘発試験は.重篤なアレルギー反応を誘発する可能性があるため.ルーチンの臨床検査としては使用できない。 皮膚テストと血清特異的IgEが陰性で.アレルゲン暴露とアレルギーの明確な臨床病歴がある場合.診断を確認する必要がある；さまざまなアレルゲンがアレルギーと診断されたが.原因アレルゲンを特定できない場合；特異的免疫療法中のアレルギー性喘息患者が.治療の耐性を評価するために.誘発テストを行うことができる。 誘発テストは.患者のインフォームド・コンセントを得た上で.救命措置と患者を救う能力があり.副作用の治療が適時に行われる.非常に必要な場合にのみ行うべきである。 疾患の増悪時に挑発的検査を行うことは望ましくない。
結論として.アレルゲンの診断には.病歴と診察に基づく徹底的で正しい評価を行う経験豊富な医師が必要である。