酵素免疫測定法（ELISA）は.酵素複合体に抗体を結合させ.それを発色させて検出する方法です。手順 ELISAは血清で検出され.最初の血液は.少なくとも30分間凝集させる必要がありますし.血清は.希釈剤で酵素複合体を希釈するために取られる.血清と陰性と陽性対照.および品質管理を追加します。1時間培養後.プレートを洗浄し.基質を添加し.30分後遮光して反応を終了し.終止液を添加して読み取る。この値により陰性か陽性かを判定する。
分 類
血清学的検査 > ウイルスの血清学的検査
測定原理
ELISA法：不活化風疹ウイルス抗原を封入した担体が被検体中の特異抗体と結合し.対応する抗体を酵素標識抗ヒト免疫グロブリンと基質で検出する。
試薬
不活化風疹ウイルス抗原を塗布したマイクロタイタープレート.陰性及び陽性基準血清以外は一般的なELISA法と同じです。
操作方法
1. 検体採取.スクリーニング検査では1回の採血で済むが.感染者の免疫状態を把握する必要がある場合は.発疹出現後3日以内の風疹疑い患者から.その後14〜21日間に採血し.同時検査する必要がある。
2.一般的な ELISA と同様に.コントロールとサンプルの各ウェルに 50μl の PBS を加え.次に 10μl のサンプルを加え.25℃で 45 分間保持し.洗浄.吸引を行う。
3.各ウェルに酵素マーカー250μlを添加し.保温後.同様に洗浄する。
4.pNPP 基質溶液 250μl を加え.同様に保温.洗浄後.1mol/L 水酸化ナトリウム 50μl を加えて反応を停止し.各ウェルの 405nm の吸光度を測定し.被験試料の結果を判定する。
5.陽性であれば.さらに希釈して抗体価測定に使用し.連続した2つのサンプルの結果を比較し.判定する。
判定方法
1.風疹ウイルスIgGおよびlgM抗体が陽性.またはIgG抗体価≧1：512で.風疹ウイルスに最近感染したことを示す。
2, 風疹ウイルスIgG抗体.IgM抗体ともに陰性で.風疹ウイルスに感染したことがないことを示す。
3.風疹ウイルスlgG抗体価＜1_512.lgM抗体が陰性であり.過去の感染歴があることを示す。
4.また.風疹ウイルスの再感染は.一過性のIgM抗体しか出現しないか.非常に低レベルで出現するため.容易に検出されない。したがって.二重血清で風疹ウイルスIgG抗体価が4倍以上上昇している場合は.lgM抗体が陽性であるかどうかにかかわらず.最近の風疹ウイルス感染の指標となる。
臨床的意義
風疹は風しんとも呼ばれ.春から初夏にかけて発症のピークを迎えます。風疹ウイルス抗体の陽性率は年齢とともに上昇し.新生児は早期に風疹ウイルスに感染した母親を通じて風疹ウイルスに対するIgG抗体を獲得します。lgM抗体は発疹の発生から約4日後に産生され.約10日でピークとなり6〜12週間.時には1年まで持続し.IgG抗体はlgM抗体より少し遅れて現れ.徐々に増加して1〜2カ月でピークとなります。IgG抗体はlgM抗体より少し遅れて出現し.徐々に上昇し.1〜2ヶ月でピークに達し.その後減少し.ほとんどが終生続く。人口の80％がこの抗体で陽性となる。
測定方法
正常範囲。抗風疹ウイルス抗体 IgM 陰性.抗風疹ウイルス抗体 IgG 陰性。
検査内容 抗風疹ウイルス抗体IgMは.主に風疹ウイルスによる急性感染の診断に用いられ.抗風疹ウイルス抗体Igは通常.感染後2週間で血清中に出現します。
臨床的意義 陽性。風疹ウイルス感染症。