HPVはDNAウイルスの一種で.ヒトが唯一の宿主であり.主に表皮の基底細胞から全身の皮膚や粘膜に侵入し.時期がくれば病気を引き起こします。 現在までに.60種類以上のHPVの亜型が確認されており.亜型によって異なる病気を引き起こすことが分かっています。 HPV検出方法:1.病理組織学的検査:角化した細胞や凹んだ空洞の細胞が確認できる。 精度は80〜90%です。 2.抗HPVカプシド抗原の免疫組織化学的検査:動物にHPVを免疫した後に作製したポリクローナル抗体で組織HPV抗原を確認する。 実際にペルオキシダーゼ・アンチペルオキシダーゼ法(PAP法)を用いて.イボ内のウイルスタンパク質を示し.イボ害にウイルス抗原が存在することを証明するのが一般的である(注1)。 また.PAAP方式やABC方式もある。 空胞化した細胞の核に褐色の粒状の沈着物が見られると陽性となる。検出率は低く.感度も高くないので型取りはできない。陽性率は40~60%である。 3.遺伝子診断:(1)ポリ・酵素連鎖反応:PCR法の開発は.特異性.感度.簡便性.迅速性などの利点を持ち.HPV検出の新しい道を開くものである。 PCRによるHPVの検出は.核酸ハイブリダイゼーション法よりも優れています。 GP-PCR法では.ゲル電気泳動で直接分析した場合.200コピーのHPVDNAが検出される。 PCR産物を核酸ハイブリダイゼーションで検出すると.感度が上がり.10コピーのHPVDNAが検出できる。 膣と子宮外膜から分泌物と細胞をスクレーパーまたは生理食塩水を染み込ませた綿棒で採取する。 細胞診とともに.検体を0.05%チメロサールを含むPBS 5mlに入れ.遠心分離(3000g.10分)によりPBSで2回洗浄し.沈殿した細胞をPBS 1mlに再懸濁し.細胞懸濁液を0.5mlとってDNA抽出する。 PCR検出によりHPV-DNA特有の増幅バンドが確認される。 PCR法の感度の高さを考えると.生検の採取や組織の研磨といった面倒な作業を避け.生殖器の剥離細胞を検査材料として使用することで十分条件を満たすことができます。 一般的には.PCR増幅産物をゲル電気泳動し.得られたDNAを観察することで直接診断が可能である。 したがって.HPV検出のためのPCR法は.短時間.簡便.迅速である。 欠点は.局在化できないことと.ウイルスの生死が不明なことである。 誤検出が起こりやすい。 治癒後もかなりの期間.陽性を維持することができます。 また.特異性も徐々に低下していく。 (2) DNAハイブリダイゼーション:HPVDNA分子ハイブリダイゼーション技術。 EGFRの免疫染色法。 免疫染色法(蛍光顕微鏡400倍で3個以上の蛍光スポットが陽性と確認できる)。 核酸ハイブリダイゼーションによりHPV-DNA関連配列を検出し.PCR検査により特定のHPV-DNA増幅帯のバンドを見ることができる。 しかし.面倒でコストがかかる。 一定の機器や条件が必要です。 4.組織化学的検査:少量の組織を採取し.HPVに特異的な抗体で染色します。 病変部にウイルス抗原がある場合は.抗原抗体複合体を使用します。 ペルオキシダーゼ-アンチペルオキシダーゼ法では.核が赤く染色されることがある。 この方法は特異的でより迅速な診断が可能であり.診断に有用である。 5.細胞学的検査:と – Pap染色用疣贅組織塗抹標本.すなわち.空胞化細胞と角化細胞の2種類の細胞を見ることができます。 と診断されることがあります。 そのため.このような “忖度 “をしてしまうのです。 コルポスコピーや拡大鏡との併用が可能。 通常の医療機関で実施する限り.概ね正確な検査が可能です。 HPV陰性とは.HPV検査が陰性であればHPVウイルスに感染していないこと.陽性であればHPVウイルスに感染していることを意味します。 陽性であれば.HPVに感染していることになりますので.すぐに通常の病院へ行く必要があります。