1985年に米国で最初のHIV抗体検査が承認されて以来.HIV抗体検査技術は免疫学と分子生物学技術の急速な発展とともに更新されてきました。2004年に厚生省が発表した「国家HIV検査技術仕様」によると.HIV抗体検査は.初回スクリーニング検査.再検査.確認検査の3つのステップに分けられます。
1.初回スクリーニング検査と再検査。
主に酵素免疫吸着法.迅速検出法.化学発光免疫測定法.時間分解蛍光免疫測定法.非侵襲的HIV抗体検査などがあります。
1.1 ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)
HIV抗体ELISA試薬は4世代を重ねてきています。
1985年.第一世代の間接法ELISA.エンベロープ抗原としてHIVウイルス溶解液.感度と特異性は高くありません.約3ヶ月のウィンドウ期間.1990年.第二世代の間接法ELISA.エンベロープ抗原として遺伝子組み換えまたは合成ペプチド.HIV-1とHIV-2を同時に検出できる.第一世代に比べて大幅に特異性が向上しました.ウィンドウ期間は約20日短縮されました。1994年.第3世代の二重抗原サンドイッチ法 第3世代の二重抗原サンドイッチ法は.第2世代と同じですが.新しいgp41ペプチドは.IgG.IgM.IgAなどを含む様々なHIV抗体のサブクラスを検出することができます。 , 1998年の第4世代は.HIV抗原と抗p24抗体を固相化した担体で.HIV抗体とp24抗原を同時に検出でき.感度はさらに向上し.「ウインドウピリオドは20日程度に短縮された」製品です。感度がさらに向上し.「ウインドウピリオド」は4~8dとさらに短縮されるが.「第2のウインドウピリオド」があり.現在は補助診断に用いられている。
1.2 迅速検査(RT)
免疫スポット検査.免疫クロマトグラフィー検査.ゼラチン粒子凝集検査などが含まれる。
この方法は簡単です:特別な装置は必要ありません.迅速:テスト結果は30分以内に得ることができます.特に緊急検査.HIV監視センチネルサイト.町の保健所や地域の保健所など。
1.3 化学発光免疫測定法:
マイクロ粒子.マイクロプレート化学発光免疫測定技術は.ELISAよりも高い感度でHIV抗体を検出します。
量子ドットを担持し.ナノ金を封入したメソポーラス材料で構築した電気化学的化学発光免疫センサーは.高い選択性と感度でHIV抗体を検出できます。
1.4 時間分解蛍光免疫測定技術。
時間分解免疫蛍光分析(ユーロピウム標識HIV抗原)と組み合わせたダブル抗原サンドイッチの適用により感度および特異性が大きく改善されました。1.5 非侵襲的HIV抗体検査
血液検査に加え.唾液・尿検査もHIV検査の新しい手段となっており.安全性や利便性の面でより多くのメリットがあります。
2 確定検査です。
HIV抗体スクリーニング陽性検体は.主にイムノブロット試験.ストリップイムノブロット試験.また放射免疫沈降試験と免疫蛍光試験などを含む.テストを確認する必要があります。
2.1 イムノブロットテスト(WB)。
WBは現在中国で最もよく使われているHIV陽性確認方法です.ELISA+WBの組み合わせはHIV診断用のゴールドスタンダードと認識され.この方法は.ELISAを使用して.より良い診断のためのものです。基本原理は.HIV全ウイルス抗原をSDS-PAGEで電気泳動し.NC膜に移し.検査する血清を加え.酵素標識した抗ヒトIgGと基質を加え.肉眼で識別できる膜の対応位置にバンドを提示させるものです。
LIA(Strip immunoblotting assay)とは.WB法を改良したもので.WB法で用いるウイルス溶解液の抗原を.遺伝子組み換えタンパク質や化学合成したペプチドを診断試薬の抗原として代用する方法です。