羊膜は.古くから生体材料として基礎・臨床で使用されている。 20世紀初頭.羊膜移植は火傷や潰瘍の傷に使われ.その後.頭蓋・脳外科.腹部外科.産科婦人科.眼科に使われるようになった。 生体工学や組織工学の技術の発展に伴い.羊膜の利用が広まり.研究が進んでいます。 正常なヒトの羊膜は.上皮細胞層.基底膜.緻密層.繊維細胞層.海綿質層に分けられる。 通常.調製された羊膜には上皮層.基底膜.緻密層のみが含まれ.繊維細胞層や海綿質層は調製時に剥がされる。 上皮層には羊膜上皮細胞と.羊膜上皮細胞から分泌される様々な成長因子が含まれています。 2.さまざまな方法で調製された羊膜の特徴 基礎研究や臨床研究で用いられる羊膜は.新鮮羊膜.凍結羊膜.羊膜細胞外マトリックスの3種類があり.それぞれに特徴があります[6]。 2.1 新鮮な羊膜 新鮮な羊膜を無菌状態で洗浄し血液を除去した後.羊膜を剥がし.4℃の冷蔵庫に保管し.24時間以内に使用するタイプです。 新鮮な羊膜は.羊膜の上皮細胞やサイトカインを保持しており.眼表面疾患の治療に使用した場合.眼表面再構築に有効である。 しかし.細胞を含んでいるため若干の抗原性があり.保存期間も短いため.使い勝手が悪い。 2.2 羊膜の凍結保存 新鮮な羊膜を100%グリセロール中で4℃にて脱水し.24時間ごとに1回.合計3回交換した。 4℃の定温冷蔵庫で保存してください。 脱水した羊膜を取り出し.コンドロイチン硫酸を含む100％グリセロール：DMEM溶液（1：1）に浸し.-80℃の超低温冷蔵庫で6ヶ月間保存した。 新鮮な羊膜に比べ.長期保存が可能で.使い勝手が良い。 2.3 グリセロールで脱水後.羊膜から細胞外マトリックスを除去し.PBSで水和.0125%トリプシンを加え.37℃室温で消化し.残った羊膜上皮細胞をセルスクレーパーで掻き取り.倒立位相差顕微鏡下で.細胞がないことを確認後.羊膜を上皮側を上にし.コンドロイチン硫酸（1：1）を含む100%グリセロール：DMEM溶液に加え平置きする。 コンドロイチン硫酸を含む100％グリセロール：DMEM溶液（1：1）に浸し.4℃の冷蔵庫で1週間.または-80℃の超低温で6ヶ月間保存した。 一部の研究者は.生理食塩水で洗浄した羊膜を012%グルタルアルデヒド.015%ドデシル硫酸ナトリウム.0125%トリプシンで架橋し.繰り返し洗浄.凍結乾燥.別包装で密封.エチレンオキサイドで滅菌している[7]。 細胞成分と可溶性タンパク質成分を除去し.コラーゲン.エラスチン.アミノグルカン.構造タンパク質などを中心とした元の組織の不溶性成分のみを保持した材料で.細胞増殖の足場や細胞接着の促進が可能で.同時に保存期間が長く.使い勝手の良い材料です。